使用高通量流式细胞仪快速鉴定新隐球菌物种复合体的品种和基因型
 
US11435291  2006-5-17  发明申请

2006-12-7
 
  本发明公开了鉴定新生隐孢子虫物种复合体中的变种和基因型组的核酸探针和分子方法。 所述方法使用具有双激光系统的流式细胞仪,所述双激光系统允许以多路复用和高吞吐量格式同时检测不同的靶序列。 所述分析使用与共价结合到荧光颜色编码微球表面的特异性寡核苷酸探针的液体悬浮杂交形式。 与它们的互补探针序列杂交的生物素化靶扩增子通过加入偶联物链霉亲和素-R-藻红蛋白来定量。 该测定是特异性的和灵敏的,并且允许鉴别1bp错配而没有明显的交叉反应性,并且能够检测101-103个基因组拷贝。 所述测定可直接与酵母细胞或分离的DNA一起使用,可在PCR扩增后不到1小时内进行,并允许以多重格式鉴定物种。 另外,除了多路复用能力之外,该测定允许在单个反应中同时检测靶序列。
 
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