| 一种单管原位嵌套式聚合酶链式反应方法及其应用 |
| CN200510025634.3 2005-4-30 发明申请 |
| 2006-11-8 |
| 一种单管原位嵌套式聚合酶链式反应方法及其 在核酸检测中的应用。反应液含内套引物和外套引物，内套引 物与目标基因顺序有错配或在5’端带一段非基因专一顺序。 内套引物与原始模板的最高允许退火温度低于第一轮反应的 退火温度，而内套引物与匹配模板的解链温度高于外套引物的 最高允许退火温度。控制第一轮PCR循环的退火温度使外套 引物能退火扩增但内套引物不能退火扩增。提高第二轮PCR 循环的退火温度使外套停止退火扩增而内套引物能退火扩增。 在第一和第二轮之间有二至若干循环退火温度低于二者的过 渡阶段，使内套引物能与原始模板退火扩增形成匹配模板启动 第二轮反应。整个PCR反应过程中不开管盖反应管也不移离 基因扩增仪。 |
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