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| - 重组水蛭素Ⅲ分子改建及其构效关系的初步研究
- 作者:谭树华 李香玉 崔莉 陈法才 吴梧桐 来源期刊:中国生物工程杂志 年卷号:2003,23(8).-69-73
- 摘要:采用一种新的PCR定点诱变技术成功地对野生型水蛭素Ⅲ进行了定点诱变。这种方法快速、简便,有效。通过突变,将野生型水蛭素Ⅲ分子的活性功能非必需区的指状结构顶端第33~36位的氨基酸残基替换为RGDS序列,并进行了高效分泌表达,表达产物分泌到细胞外发酵液中。改构的水蛭素突变体与野生型水蛭素Ⅲ相比,两者的抗凝血酶活性基本...
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- 刺桐胰蛋白酶抑制剂基因的构建及表达研究
- 作者:任启生 陈黄实 宋新荣 李伯松 来源期刊:中国生物工程杂志 年卷号:2003,23(7).-102-104
- 摘要:刺桐胰蛋白酶抑制剂是胰蛋白酶、组织型纤溶酶原激活剂及瑞替普酶特异性的抑制剂,可作为配基制成亲合填料用于纯化上述酶。通过化学合成和PCR结合法合成了ETI基因,经过序列分析后将其克隆到大肠杆菌表达载体质粒pET32a中,并在大肠杆菌中进行诱导表达。表达蛋白分子量同理论值一致,生物活性检测表明复性后的ETI对胰蛋白酶及...
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- 刺桐胰蛋白酶抑制剂亲和填料的制备及纯化瑞替普酶
- 作者:陈黄实[1] 任启生[2] 宋新荣[2]... 来源期刊:中国生物工程杂志 年卷号:2003,23(6).-87-89
- 摘要:刺桐属胰蛋白酶抑制剂(ETI)是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,能特异性的抑制胰蛋白酶、组织纤溶酶原激活剂(t-PA)、瑞替普酶(r-PA)等丝氨酸蛋白酶。实验利用ETI工程菌,经诱导表达、体外复性及纯化获得ETI蛋白,并将该蛋白键合到CNBr活化的琼脂糖凝胶,制备ETI亲和填料,纯化瑞替普酶。
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- 质谱数据库查询软件的应用与评价
- 作者:李峰[1] 肖志强[2] 陈主初[1] 来源期刊:生命的化学 年卷号:2003,23(6).-467-469
- 摘要:最近的蛋白质组学研究进展表明以质谱为核心的蛋白质组学在分子生物学,细胞生物学乃至将来的系统生物学中都扮演着一个举足轻重的角色。毫无疑问,在质谱鉴定过程中,质谱仪本身的精度对实验结果有着至关重要的作用;除此之外,质谱结果数据库查询软件的准确性直接影响了查询结果的准确性。本文就目前常用的质谱数据库查询软件的工作原理,统...
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- 趋化性细胞因子MTCKl/mPBP的原核表达、纯化及活性分析
- 作者:李燕 付文先 朱梦嫘 陈慰峰 来源期刊:中华微生物学和免疫学杂志 年卷号:2003,23(6).-459-463
- 摘要:目的 原核表达、纯化小鼠CXC亚家族趋化性细胞因子MTCK1/mPBP并测定其生物学活性。方法 构建原核表达载体pQE-30-MTCK1/mPBP;在大肠杆菌M15菌株中表达重组蛋白6xHisMTCK1/mPBP,利用镍-亚硝胺乙酸-组氨酸(Ni-NTA-His)亲和层析法对重组蛋白进行纯化。采用Boyden小室对...
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