Taqman—MGB探针荧光定量PCR方法检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒的研究 |
作者:徐丽美 李福英; 出处:应用海洋学学报. 2013(1).-133-137 |
关键词:海洋生物学 传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV) 荧光定量PCR Taqman-MGB探针 |
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文章摘要:本文根据GenBank中对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)基因组上的保守序列,采用Taqman—MGB荧光定量PCR方法,设计了一组特异性引物和探针.利用阳性标准模板进行了定量PCR条件的优化研究.结果显示,在10^1~10^8拷贝范围内标准曲线的线性关系为R=0.9994,检测灵敏度达到10拷贝,重复检测的变异系数均小于2%.利用上述建立的方法和条件,测定39份不同来源的对虾样品中IHHNV,检出率为49%.因此所建立的荧光定量PCR具有较高的灵敏度、特异性和重复性,可作为IHHNV快速的定量检测方法. |
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