近海温泉中嗜热菌Geobacillus sp. ZH1锰超氧化物歧化酶的克隆与表达 |
作者:李鹤宾 洪璇 黄秀梅; 出处:台湾海峡. 2012,31(3).-375-379 |
关键词:海洋生物学 超氧化物歧化酶 克隆 表达 重构 |
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文章摘要:将嗜热菌Geobacillus sp. ZH1的超氧化物歧化酶(supseroxide dismutase,SOD)基因插入表达载体pET-32α(+),在Escherichia coli BL21(DE3)中进行表达,并利用亲和层析纯化重组超氧化物歧化酶.将制备的脱辅SOD进行Mn2+和Fe2+金属重构后,得到的Mn2+重构SOD的比活力达668U/mg,Fe2+重构Fe-SOD没有活性,说明ZH1菌株的超氧化物歧化酶为Mn-SOD.凝胶过滤及SDS-PAGE分析显示,Mn2+重构SOD为同聚二聚体,亚基分子量为71.7 kDa.这些研究结果为进一步研究该酶的生化特性及酶的定向进化研究奠定了良好的基础. |
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