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| 嗜热栖热菌重组锰超氧化物歧化酶的性质 |
| 作者:李鹤宾[1,2] 席守民[2] 杨五彪[2] 叶子坚[1]; 出处:台湾海峡. 2012,31(1).-53-57 |
| 关键词:海洋生物学;锰超氧化物歧化酶;热稳定;嗜热栖热菌wl |
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| 文章摘要:嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)wl的超氧化物歧化酶基因在Escherichia coli BL21(DE3)中进行表达.采用Ni-NTAagarose亲和层析获得重组超氧化物歧化酶,比活力达565U/mg.重组酶的相对分子质量为110.9kDa,亚基相对分子质量为28.3kDa,该酶为同聚四聚体蛋白.重组酶对氯仿.乙醇和SDS敏感,对H_2O_不敏感,并且它的紫外最大吸收波长位于279ilm,判断其属于锰超氧化物歧化酶类型.1.0mmol/dm^3Mn^2+对重组酶有激活作用,同浓度的其他金属离子MgH、Ca^2+、Ba^2+、Co^2+、Cu^2+、Zn^2+和Fe^2+对重组酶活力都有抑制作用,其中以Co^2+的作用最强,抑制了约64%的酶活性.重组酶在70℃下处理1h,保持原有活力的60%,即使在90℃下处理1h,仍保持原有活力的35%.在pH值为4.0-11.0的缓冲液中25℃下处理1h,保持65%以上的原始活力.由此可见,重组锰超氧化物歧化酶具有高的热稳定性和宽pH稳定性,在工业上具有巨大的应用潜力. |
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